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三聚氰胺ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及注意事項(xiàng)

點(diǎn)擊次數(shù)：13125 發(fā)布時(shí)間：2016/1/8 10:53:04

使用目的：本試劑盒用于飼料中三聚氰胺殘留的定量檢測(cè)。

三聚氰胺elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng) ELISA 方法，在微孔板包被有三聚氰胺偶聯(lián)抗原，加入三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)品或樣品，游離三聚氰胺與微孔條上預(yù)包被的三聚氰胺偶聯(lián)抗原互相競(jìng)爭(zhēng)抗三聚氰胺抗體酶標(biāo)記物，用 TMB 底物顯色，加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下進(jìn)行檢測(cè)，吸光值與樣品中三聚氰胺含量成反比，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中三聚氰胺的含量。

樣品處理程序（樣品在提取過(guò)程中，要嚴(yán)格按說(shuō)明書操作，提取過(guò)程中應(yīng)準(zhǔn)確稀釋，否則會(huì)出現(xiàn)結(jié)果不準(zhǔn)確，樣品應(yīng)當(dāng)保存在陰涼避光之處及冷藏保存）

1.取10g粉碎的樣品，加 20ml 70%甲醇溶液

2.強(qiáng)力振蕩3分鐘

3.用Whatman No 1濾紙過(guò)濾

4.取25µl處理后的樣品，加入25µl樣本稀釋液于反應(yīng)孔中（樣本稀釋倍數(shù)為2）

三聚氰胺ELISA試劑盒參數(shù)：

本試劑盒檢測(cè)下限為0.05ppb

B0吸光度*佳值應(yīng)大于1.0

試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8％，板間誤差小于15％。

用本說(shuō)明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80％。

三聚氰胺ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

1.使用試劑盒前請(qǐng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。

2.不要使用過(guò)期試劑盒。

3.試劑盒使用前，將試劑恢復(fù)至室溫（ 25±2℃），建議至少回溫2小時(shí)。

4.標(biāo)準(zhǔn)品中含有三聚氰胺，使用時(shí)應(yīng)特別注意，操作時(shí)應(yīng)帶手套。

5.終止液中含有硫酸，使用時(shí)防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。

6.不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不能混用，否則會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。

7.不同批號(hào)試劑盒中的試劑不得混用；不同標(biāo)準(zhǔn)品、樣品所用吸頭不得混用，否則會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

原創(chuàng)作者：上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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