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上海恒遠(yuǎn)歸納ELISA經(jīng)驗(yàn)之包被

點(diǎn)擊次數(shù):12900   發(fā)布時(shí)間:2014/7/22 10:22:12

    明日就是這炎夏中的節(jié)氣大暑了,是一年中氣溫、*熱的時(shí)期,還是要提醒朋友們注意elisa試劑盒的溫度保溫,今天上海恒遠(yuǎn)為朋友們歸納出ELISA經(jīng)驗(yàn)總結(jié)(包被)。
    大致步驟為:選擇合適的板條→是包被液的選擇→是包被濃度的確定。
 
    包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時(shí)間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定?贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。
    通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置一個(gè)晚上,37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的*適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過(guò)實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。
 
    抗原的包被要根據(jù)具體情況而定,比如有的抗原,只要加入抗原包被液后,4c放置一個(gè)晚上就可以。剛開始做一種抗原或抗體的ELISA時(shí)先做幾個(gè)梯度,以確定*適合的濃度。
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原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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